作者:科藝普實驗室設計集團 來源:zfkjf.cn 時間:2022-07-14 11:29:49 閱讀:736次
PCR實驗室通常采用非單向流送風方式,所謂非單向流,指氣流流線方向不平行,風速也不一致。非單向流的氣流組織方式有上送下回式、上送下側(cè)回式、測送下回式、上送上回式、PCR實驗室一般采用上送下回式。上部送風依靠高效送風口進入房間,下部回風依靠每個房間的對稱分布的排風柱下部的排風口排風。
目前PCR應用已得到長足的發(fā)展,已成為疫病診斷,疫情控制等方面的有力工具,為了避免在PCR方法中出現(xiàn)污染及出現(xiàn)假陽性和假陰性結果等現(xiàn)象,保證結果的準確性,在實驗室環(huán)境安全控制上嚴格做到實驗室獨立區(qū)域設計,功能分區(qū)明確,保證實驗室潔凈環(huán)境,人流物流嚴格分流,設計合理的壓力梯度,形成有序的氣流組織方向,切實做到避免交叉污染。
PCR是聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction)的簡稱,是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。
避免污染是PCR實驗室設計建設首要考慮重點
由于PCR技術的高度敏感性,PCR技術要求高、影響因素多,從樣品制備到結果的產(chǎn)生,任何一處細微的失誤均會造成結果的偏差,導致樣品的假陽性和假陰性結果。
PCR實驗室研究過程中,很多操作都會產(chǎn)生氣溶膠,比如離心、混勻等操作閔。為保證環(huán)境安全,PCR實驗室設計建設需獨立區(qū)域設計,避免與其余環(huán)境的交叉混雜,下面SICOLAB根據(jù)我們做過的工程實例從平面布局、凈化區(qū)域劃分,人物流設計和壓差控制等方面具體介紹。
一丶PCR實驗室區(qū)域劃分
1、功能劃分
試劑準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應一區(qū)、純化區(qū)、擴增反應二區(qū)、后純化區(qū)(如上布局圖)。
2、SICOLAB設計原則
按國家衛(wèi)生部的要求,各實驗區(qū)域必須是相互獨立的,不能直通,每個獨立實驗區(qū)設有專門的閘間供工作人員換工作服和鞋,進入各工作區(qū)域必須嚴格遵循單一方向順序,即只能從左邊試劑準備區(qū),標本制備區(qū),擴增反應一區(qū),純化區(qū),擴增反應二區(qū)到后純化區(qū),避免發(fā)生交叉污染。
3、為避免樣本間的交叉污染,房間采取凈化控制,總體設計為10萬級。閘間(緩沖間)設計為正壓區(qū),保證與外界環(huán)境隔離,避免從鄰近區(qū)域進入本區(qū)域的氣溶膠污染。
二、氣流設計
人流物流設計各行其道,避免交叉混雜,整個區(qū)域設計一個公用走廊,工作區(qū)域之間設計試劑物品傳遞專用窗,做到人物分流。
1、物流:在試劑準備區(qū)與標本制備區(qū)、標本制備區(qū)與PCR擴增區(qū)之間,以及擴增區(qū)域和純化區(qū)之間設計有電子連鎖不銹鋼傳遞窗,以單向進行試劑、標本等物品傳送,配制的試劑通過單向傳遞窗由試劑準備區(qū)傳遞到標本制備區(qū),處理過的標本通過單向傳遞窗由標本制備區(qū)傳遞到PCR擴增區(qū),按照工藝流程逐次傳遞,避免返流。單向物品傳送系統(tǒng)既保障了標本試劑不受污染,又保障了標本試劑不污染環(huán)境。
2、人流:人員通過閘間分別進入各自實驗區(qū)域,進出各實驗區(qū)域需要在閘間區(qū)域更換潔凈工作服,手消毒等。
三、壓差設計
PCR實驗室應設計為負壓潔凈室,通過壓差控制,使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染,并且降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
各個實驗室與非潔凈區(qū)之間的閘間保持正壓,>10Pa,實驗與閘間之間的氣流組織方向為:試劑準備區(qū)空氣流向閘間,標本制備區(qū)流向閘間,而PCR擴增區(qū)氣流方向由閘間流向PCR擴增區(qū),純化區(qū)同理;
同時按照試劑單向流方向,各個實驗室之間設計不同壓力梯度來實現(xiàn)單向氣流組織方向,由試劑準備區(qū)(+20Pa)、標本制備區(qū)(+15Pa)、擴增反應一區(qū)(-5Pa)、純化區(qū)(-10Pa)、擴增反應二區(qū)(-20Pa)、到后純化區(qū)(-25Pa)壓力逐漸降低,形成單向負壓壓力梯度。
四、其它安全設施
PCR實驗室為潔凈空調(diào)系統(tǒng),系統(tǒng)形式采用直流系統(tǒng)不回風,防止交叉污染;試劑準備間設計超凈臺,保證試劑免受空氣環(huán)境污染;標本制備間設計生物安全柜,保證標本不污染室內(nèi)環(huán)境,并保證標本免受環(huán)境污染。
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